347 komposisi kimia stainless steel Gedhene getih vena utawa kapiler, khusus kanggo SARS-CoV-2, respon sel T nemtokake kekebalan marang COVID-19.

Matur nuwun kanggo ngunjungi Nature.com.Sampeyan nggunakake versi browser kanthi dhukungan CSS winates.Kanggo pengalaman paling apik, disaranake sampeyan nggunakake browser sing dianyari (utawa mateni Mode Kompatibilitas ing Internet Explorer).Kajaba iku, kanggo njamin dhukungan sing terus-terusan, kita nuduhake situs kasebut tanpa gaya lan JavaScript.
Slider nuduhake telung artikel saben slide.Gunakake tombol mburi lan sabanjuré kanggo mindhah liwat minger, utawa tombol controller geser ing mburi kanggo mindhah liwat saben geser.

347 komposisi kimia stainless steel

Stainless Steel 347 Coil Tube Komposisi Kimia

Komposisi kimia lan sifat mekanik tabung coil stainless steel 347 kaya ing ngisor iki:
- Karbon - 0,030% maks
- Kromium – 17-19%
- Nikel – 8-10,5%
- Mangan - 1% maks

Stainless Steel 347 Coil Tube Sifat Mekanik

Miturut Produsen Tabung Coil Stainless Steel 347, Properti Mekanik 347 Coil Tube:
- Kekuwatan Tarik (psi) - 75.000 min
- Kekuwatan Ngasilake (psi) - 30.000 min
- Elongation (% ing 2″) - 25% min
- Kekerasan Brinell (BHN) - 170 maks

Aplikasi & Panggunaan saka Stainless Steel 347 Coil Tube

• Tabung Coil Stainless Steel 347 digunakake ing Pabrik Gula.
• Stainless Steel 347 Coil Tube digunakake ing Pupuk.
• Stainless Steel 347 Coil Tube digunakake ing Industri.
• Stainless Steel 347 Coil Tube digunakake ing Power Plants.
• Stainless Steel 347 Coil Tube digunakake ing Pangan lan Susu.
• Tabung Coil Stainless Steel 347 digunakake ing Pabrik Minyak lan Gas.
• Produsen Tube Coil Stainless Steel 347 digunakake ing Industri Shipbuilding.

Sel T spesifik SARS-CoV-2 dianggep nglindhungi infeksi lan perkembangan COVID-19, nanging ora ana bukti langsung babagan iki.Ing kene, kita mbandhingake pangukuran getih kabeh sel T interferon-γ spesifik SARS-CoV-2 kanthi asil tes diagnostik COVID-19 sing positif (PCR lan/utawa aliran lateral) sajrone 6 sasi sawise koleksi getih Lian.Antarane 148 peserta sing nyumbang conto getih vena, gedhene respon sel T spesifik SARS-CoV-2 luwih dhuwur ing wong sing tetep dilindhungi tinimbang sing kena infeksi (P <0.0001).% risiko infèksi, nalika intensitas dhuwur nyuda resiko iki dadi 5,4%.Asil kasebut umum kanggo tambahan 299 peserta sing nguji tes getih kapiler sing bisa diukur sing bisa nggampangake akses menyang data kekebalan sel T skala populasi (14,9% vs 4,4%).Dadi, pangukuran sel T khusus kanggo SARS-CoV-2 bisa prédhiksi risiko infeksi lan kudu dievaluasi nalika ngawasi status kekebalan individu lan populasi.
Ngukur lan mangerteni respon imun kanggo infeksi SARS-CoV-2 penting kanggo ngembangake strategi masa depan sing efektif kanggo nyuda dampak kesehatan lan ekonomi masarakat saka wabah COVID-19 ing mangsa ngarep.Identifikasi hubungan imun bakal menehi informasi penting babagan kerentanan populasi kanggo infeksi virus, bisa uga minangka peringatan awal babagan rawat inap puncak, lan uga ngidini wong ngatur risiko infeksi lan risiko infeksi wong liya.Pengawasan kekebalan wis kabukten kritis kanggo ngevaluasi efektifitas vaksin COVID-19 ing pasien sing sehat lan berisiko tinggi1,2,3 utamane ing mutan SARS-CoV-24, lan deteksi immunocompromised tegese perlu kanggo ngundhakake Kekebalan Divaksinasi lan nyegah. wabah mangsa ngarep.
Tingkat kekebalan individu kanggo infeksi SARS-CoV-2 gumantung saka pirang-pirang faktor: viral load nalika kena pajanan, varian virus, umur, status vaksinasi/infeksi sadurunge, komorbiditas, obat-obatan, lan sing paling penting, infeksi anti-SARS-CoV. .2 respon imun adaptif dumadi nalika kena virus5.Evaluasi respon imun kanggo infeksi SARS-CoV-2 lan/utawa vaksinasi wis fokus ing tes serologis sing ngukur anané antibodi khusus kanggo protein struktural (contone spike glycoprotein).Nanging, anané utawa ora ana antibodi mung ora nemtokake respon imun protèktif kanthi akurat, amarga respon saya dikurangi sacara signifikan sajrone wektu6 lan netralisasi varian SARS-CoV-2 ing wong sing pulih utawa divaksinasi kaping pindho Aktivitas lemah, sing bisa nyebabake akeh jumlah infeksi terobosan7.Pancen, pangayoman marang gejala COVID-19 sing disebabake dening varian Omicron (B.1.1.529) suda nganti udakara 10% sawise mung 4-6 sasi vaksinasi mRNA, sanajan pangayoman marang penyakit abot tetep > 68% paling sethithik 7 sasi8.Ngukur respon sel T memori adaptif, sing menehi perlindungan jangka panjang marang infeksi virus, minangka indikator kerentanan paling apik kanggo infeksi SARS-CoV-2, lan mulane minangka indikasi sing luwih apik babagan risiko tes positif kanggo COVID-199, amarga T spesifik. sel bisa nyegah infeksi.tanpa serokonversi10,11.Nanging, pangukuran respon sel T kurang diwenehi perhatian amarga kesulitan metodologis lan masalah logistik kanggo njupuk lan ngangkut sampel getih vena, utamane nalika nindakake studi observasional gedhe kanggo netepake khasiat vaksin lan ngawasi kekebalan.Nanging, individu sing divaksinasi nuduhake aktivitas sel T sing kuat marang varian SARS-CoV-2, sing bisa ngimbangi kelangan reaktivitas antibodi kanggo mbatesi keruwetan COVID-1912,13.
Ing kene, kita nyoba ngerti apa siji pangukuran respon sel T SARS-CoV-2 bisa prédhiksi risiko mutlak infeksi SARS-CoV-2 sajrone 6 wulan sampling getih, preduli saka faktor sing mengaruhi kekebalan sadurunge.Kanggo nggawe tes sel T kanthi throughput sing dhuwur lan bisa ditrapake kanggo pasinaon sing luwih gedhe, kita uga nyoba nggawe tes miniatur supaya bisa ditindakake nggunakake conto getih driji kapiler.
Kita ngukur respon imun seluler lan humoral ing donor sehat nggunakake deteksi gabungan sel T SARS-CoV-2 lan antibodi IgG adhedhasar getih vena kabeh (kanggo karakteristik peserta, deleng Maret 2022 14. Ing donor sing divaksinasi, SARS-CoV-2- respon T-selular spesifik ditemtokake kanthi ngukur tingkat interferon-γ plasma (IFN-γ) sawise stimulasi getih kabeh karo peptida SARS-CoV-2 (kaya sadurunge, referensi 14,15,16,17,18) lan respon IgG sing ana gandhengane. karo nukleokapsid (N) tambah ing wong sing nglaporake infeksi sadurunge, sanajan respon loro kasebut luwih dhuwur ing donor sing durung divaksinasi sadurunge, maksimal ing awak (Gambar 1a, b) Respon IgG marang glikoprotein spike (RBD, S1, S2) paling dhuwur ing donor sing wis divaksinasi sadurunge (Gambar 1c-e).
respon sel T IFN-γ+ spesifik SARS-CoV-2 diukur kanthi tes getih kabeh vena lan adhedhasar vaksinasi peserta lan status infeksi SARS-CoV-2 sadurunge (dikonfirmasi dening PCR lan / utawa tes aliran lateral)' Vac + /Inf +' n = 60 (ijo), 'Vac + /Inf-' n = 82 (biru), 'Vac-/Inf +' n = 4 (kuning), 'Vac-/Inf-' n = 1 (ora ditrapake).Reaksi pengikatan IgG spesifik SARS-CoV-2 target nukleokapsid (“N”) (b; ****P <0,0001, **P = 0,0016), domain pengikat reseptor berduri (“RBD”) (c; ** P = 0,0022, *P <0,015), subunit spike 1 (“S1”) (d; ***P = 0,0005, *(Vac + /Inf+ vs. Vac + /Inf-) P = 0,022, *(Vac- /Inf+ vs. Vac+/Inf-) P = 0,012) lan subunit puncak 2 ("S2") (e) diukur kanthi tes getih kabeh vena lan adhedhasar vaksinasi peserta lan SARS -CoV-2 sadurunge (dikonfirmasi dening PCR lan/ utawa tes aliran lateral) status infèksius.'Vac + /Inf +' n = 60 (ijo), 'Vac + /Inf-' n = 71-82 (biru), 'Vac-/Inf +' n = 4 (kuning).Perbandhingan digawe nggunakake tes Kruskal-Wallis, diatur kanggo macem-macem banding nggunakake tes Dunn.Data ditampilake minangka grafik (garis tengah ing median, wates ndhuwur ing persentil 75, watesan ngisor ing persentil 25) kanthi kumis ing nilai minimal lan maksimal.Saben titik nggambarake donor.Data mentah diwenehake kanthi bentuk file data mentah.
Sawise sampling getih, peserta dijaluk nglaporake dhewe asil tes PCR lan/utawa aliran lateral positif kanggo COVID-19;yen peserta dites positif antarane 1 September 2021 lan 29 Desember 2021, dheweke dianggep kena infeksi Delta (B.1.617.2) varian coronavirus lan Omicron (B.1.1.529) menyang Public Health Wales sawise 29 Desember 2021, nalika pilihan iki badhan dadi dominan.Ing antarane 148 donor sing bisa dievaluasi, tingkat infeksi 26,3% (39/148) sajrone 6 wulan donor getih, 38 sing nampa dosis kaping pindho utawa kaping telu saka vaksin COVID-19 (terobosan infeksi kedadeyan sawise Pfizer/BioNTech ( BNT162b2) vaksin mRNA utawa vaksin AstraZeneca (ChAdOx1 nCoV-19));donor sing ora divaksinasi uga kena infeksi.Gedhene respon sel T IFN-γ-spesifik SARS-CoV-2 spesifik luwih murah tinimbang sing nglaporake tes diagnostik positif kanggo COVID-19 tinimbang donor sing ora kena infeksi (P <0.0001; Gambar 2a), utamane amarga induksi optimal saka respon sel T kanthi vaksinasi ing sawetara peserta (P = 0.050; Gambar Tambahan 1).Ora ana korélasi antarane gedhene respon sel T IFN-γ+ lan wektu kanggo asil tes COVID-19 sing positif (Gambar Tambahan 2).Ing kontras, ora RBD-, S1-, S2-naleni respon IgG (Gambar 2b-d) utawa RBD-, S1-neutralizing respon antibodi tartamtu kanggo alam bébas utawa delta SARS-CoV-2 (B.1.617).) (Tambahan Gambar. 3) bisa mbedakake antarane wong sing duwe risiko infeksi.Nanging, respon IgG sing ana gandhengane karo N sing sithik nglawan SARS-CoV-2 ana hubungane karo risiko infeksi COVID-19 (P = 0.0084; Gambar 2e);sing dites positif 85% kurang kamungkinan (P = 0.00035; UTAWA 0.15, 95).% CI: 0,047-0,39 (Tambahan Gambar 4).
Sampel getih vena saka donor sehat (n = 148) ngevaluasi respon sel T IFN-γ+ spesifik SARS-CoV-2 (a; ****P <0.0001) lan ikatan reseptor Spike menyang SARS-CoV spesifik -2 rangsang.domain (“RBD”) (b), spike 1 subunit (“S1″) (c), spike 2 subunit (“S2″) (d), and nucleocapsid (“N”) (e; **P = 0,0084 ) .Peserta sing dites positif kanggo COVID-19 (PCR lan / utawa aliran lateral) diidentifikasi;kabeh infèksi dumadi ing 6 sasi sampling getih.Perbandhingan digawe nggunakake test Mann-Whitney loro-buntut.Data ditampilake minangka grafik (garis tengah ing median, wates ndhuwur ing persentil 75, watesan ngisor ing persentil 25) kanthi kumis ing nilai minimal lan maksimal.Saben titik nggambarake donor.ns ora penting.Peta panas f nuduhake korélasi pangkat Spearman antarane variabel kanggo set data sing ditemtokake.Perbandhingan sing ora signifikan sacara statistik ora kalebu saka matriks lan ditandhani karo sel kosong.Data mentah diwenehake kanthi bentuk file data mentah.
Potongan positif diagnostik prasetel saka 14 dianggep banget sewenang-wenang kanggo netepake risiko infeksi maneh, mula kisaran interkuartil ditetepake kanggo netepake parameter risiko mutlak.Model statistik, sing mung kalebu variabel sing duwe pengaruh sing signifikan ing asil, nuduhake manawa gedhene respon sel T IFN-γ+ spesifik SARS-CoV-2 minangka biomarker kekebalan sing paling penting kanggo nemtokake kemungkinan individu dadi. dites kanggo COVID.-19 positif (Gambar 2f lan Gambar Tambahan 4).Pasien kanthi respon sel T IFN-γ+ spesifik SARS-CoV-2 ing kuartil katelu (194-489 pg/ml IFN-γ) lan kaping papat (>489 pg/ml IFN-γ) 65% (P = 0,055; UTAWA 0,35, 95% CI: 0,11-1,00) lan 90% (P = 0,0050; UTAWA 0,098, 95% CI: 0,014-0,42) luwih akeh peserta.Kemungkinan tipis (Tambahan Gambar 4).Sakabèhé, peserta kanthi respon sel T spesifik SARS-CoV-2 saka getih vena ≤79 pg / mL IFN-γ duwe risiko infeksi terobosan 43.2% ing 6 wulan, dibandhingake karo respon> 489 pg / mL.ml saka IFN-γ duwe risiko infeksi 5,4% (tabel 2).
Tes getih lengkap vena diwatesi ing ruang lingkup amarga perlu kanggo koleksi sampel dening phlebotomist.Kanggo nambah kasedhiyan tes sel T lan IgG kanggo SARS-CoV-2, metode sampling getih kapiler alternatif wis dikembangake kanggo ngidini para peserta njupuk conto getih driji ing omah.Kanggo kawruh sing paling apik, durung ana laporan sadurunge babagan pangukuran fungsi sel T spesifik antigen ing sampel getih kapiler.Korélasi sing kuat sadurunge wis ditampilake ing antarane jumlah limfosit sing dipikolehi nggunakake conto getih kapiler lan vena sing padha.Kajaba iku, wis dilaporake manawa kabeh tes adhedhasar getih sing ngukur respon sel T spesifik SARS-CoV-2 mung nggunakake 320 μL getih vena,20 ngilangi keprihatinan babagan frekuensi sel T progenitor ing conto getih kapiler.
Kita nggunakake tes kolaboratif standar dhuwur saka sel T SARS-CoV-2 lan antibodi IgG adhedhasar getih kapiler kanggo ngukur respon imun seluler lan humoral ing peserta kanthi macem-macem komorbiditas lan status vaksinasi / infeksi sadurunge (Tabel 1).direkrut saka tengen UK antarane 24 Januari lan 14 Maret 202214. Mayoritas (90,9%) saka conto driji dijupuk bener lan dikirim menyang laboratorium ing 24 jam koleksi.Ing sawetara kasus, conto ditampa ing 48 jam saka teken getih, nanging ora ana conto sing lulus kontrol kualitas lan ora mengaruhi sel T utawa pangukuran antibodi sakabèhé (Tambahan Gambar 5).Sanajan ana bedane ukuran respon sel T IFN-γ+ spesifik SARS-CoV-2 sing diukur ing sampel getih kapiler lan vena ing sawetara individu, ora ana bedane sing signifikan sakabèhé (P = 0.88; Gambar Tambahan 6. ).).
Tanggepan sel T IFN-γ+ spesifik SARS-CoV-2 tambah akeh ing individu sing divaksinasi sing uga nglaporake infeksi sadurunge (P = 0.0001), nanging ora luwih dhuwur tinimbang individu donor sing durung divaksinasi sadurunge (P = 0.19, Fig. 3a).).Tanggepan IgG marang spike glycoprotein (RBD, S1, S2) luwih dhuwur ing donor sing divaksinasi tinimbang donor sing ora divaksinasi, tanpa dipikirake status infeksi sadurunge (Gambar 3b-d).Sing nggumunake, rata-rata respon IgG sing kaiket N paling dhuwur ing peserta sing durung divaksinasi sadurunge infeksi dibandhingake karo peserta sing divaksinasi, sanajan iki ora signifikan (Gambar 3e).Antarane donor sing ora divaksinasi lan ora kena infeksi sing nyatakake dhewe, 15 saka 37 (40,5%) peserta positif kanggo N-linked IgG, ing ndhuwur ambang 2,0 BAU / mL14 sing wis ditemtokake sadurunge;iki 15 peserta Rolas pasien kasebut dites positif kanggo respon sel T IFN-γ + ing ndhuwur ambang sing wis ditemtokake sadurunge 22.7 pg / mL IFN-γ14.Mula, kemungkinan peserta kasebut sadurunge kena infeksi SARS-CoV-2 lan ora dites kanggo COVID-19 amarga pilihan pribadi, kekurangan PCR lan / utawa peralatan aliran lateral, utawa asimtomatik.Sanajan ana korélasi sing signifikan antara tanggepan sel T marang tingkat IFN-γ+ lan N-linked IgG ing donor sing ora divaksinasi (P = 0.0044; Gambar Tambahan, respon IgG sing disambung-N mudhun luwih cepet tinimbang respon IgG sing disambung N, dene IFN-γ. + Tanggepan sel T tetep ora preduli saka status vaksinasi, sanajan jumlah donor ing 50 minggu sawise tantangan kurang (Tambahan Gambar 8). sel lan RBD sing gegandhengan, sanajan peserta sing nampa rong dosis BNT162b2 diikuti karo vaksinasi mRNA1273 nuduhake tingkat sel IFN-γ + T sing luwih dhuwur luwih sensitif marang SARS-CoV-2 tinimbang sing nampa rong dosis ChAdOx1 lan BNT162b2 (Tambahan). Fig. 9) Kajaba iku, komorbiditas sing dilapurake ora ana bedane sakabèhé ing respon sel T sing diamati dibandhingake karo donor sehat (Tambahan Gambar 10).
respon sel T IFN-γ+ spesifik SARS-CoV-2 diukur kanthi tes kapiler getih kabeh lan adhedhasar vaksinasi peserta lan status infeksi SARS-CoV-2 sadurunge (dikonfirmasi dening PCR lan / utawa tes aliran lateral).'Vac + /Inf +' n = 42 (ijo), 'Vac + /Inf-' n = 158 (biru), 'Vac-/Inf +' n = 33 (kuning), 'Vac- /Inf-' n = 37 (abu-abu).****P <0,0001, ***P = 0,0001, *(Vac+/Inf- vs. Vac-/Inf-) P = 0,045, *(Vac-/Inf+ vs. Vac- /Inf-) P = 0,014 .Reaksi pengikatan IgG spesifik SARS-CoV-2 menyang domain pengikat reseptor spike ("RBD") (b; ****P <0,0001, ns: ora signifikan), subunit spike 1 ("S1") (c; * * **P <0,0001, ns: ora signifikan), subunit spike 2 (“S2″) (d; ****P <0,0001, ***P = 0,0005, *P = 0,016) lan nukleokapsid (“N”) (e; ****P <0.0001, ns ora signifikan) diukur nggunakake analisis getih kabeh vena lan adhedhasar vaksinasi peserta lan SARS-CoV-2 sadurunge (dikonfirmasi dening PCR lan / utawa analisis aliran lateral) Infèksi dipérang dadi status.'Vac + /Inf +' n = 46 (ijo), 'Vac + /Inf-' n = 182 (biru), 'Vac-/Inf +' n = 34 (kuning), 'Vac-/Inf-' n = 37 (abu-abu).Perbandhingan digawe nggunakake tes Kruskal-Wallis, diatur kanggo macem-macem banding nggunakake tes Dunn.Data ditampilake minangka grafik (garis tengah ing median, wates ndhuwur ing persentil 75, watesan ngisor ing persentil 25) kanthi kumis ing nilai minimal lan maksimal.Saben titik nggambarake donor.Data mentah diwenehake kanthi bentuk file data mentah.
Kaya sadurunge, peserta dijaluk nglaporake asil PCR lan / utawa aliran getih lateral sing positif kanggo COVID-19;miturut Badan Kesehatan Inggris, para peserta dianggep wis kena infeksi Omicron coronavirus (B.1.1.529) nalika nyoba varian virus positif, amarga iki minangka varian dominan ing Inggris sajrone wektu sinau.Ing antarane 299 donor sing bisa dievaluasi, kita ndeleng tingkat infeksi 8.0% (24/299) sajrone telung wulan sumbangan kapiler, pitung ora divaksinasi.Proporsi komorbiditas ing antarane kabeh peserta luwih murah ing wong sing dites positif kanggo COVID-19 (10.7%) tinimbang sing dites negatif kanggo COVID-19 (24.4%, Tabel 1), sing bisa uga amarga kasunyatan manawa peserta sing duwe penyakit tartamtu. penyakit luwih ati-ati lan nglindhungi saka jalaran potensial kayata diabetes lan kanker.Kaya sing diamati ing kohort getih vena, sel T interferon-γ (IFN-γ) spesifik spesifik SARS-CoV-2 sing diukur ing conto getih kapiler saka individu sing nglaporake tes diagnostik positif kanggo COVID-19.Ukuran respon luwih murah tinimbang donor sing ora kena infeksi (P = 0.034; Gambar 4a) amarga induksi respon sel T sing relatif kurang kanthi vaksinasi lan / utawa infeksi sadurunge (Tambahan Gambar 11).Kajaba iku, respon RBD-, S1-, S2-binding IgG (Gambar 4b-d) utawa RBD-, S1-neutralizing respon antibodi ora spesifik kanggo jinis liar utawa delta SARS-CoV-2 (B. 1.617).(Gambar Tambahan 12).Individu kanthi risiko infeksi sing signifikan bisa diidentifikasi.Beda karo kohort vena, respon IgG sing gegandhengan karo N uga ora mbedakake risiko COVID-19 (Gambar 4e), nuduhake yen varian Omicron (B.1.1.529) nambah evasion kekebalan ing wong sing kena infeksi sadurunge, kaya sing dijelasake 21. Beda, kekuwatan respon sel IFN-γ T spesifik SARS-CoV-2 maneh dadi variabel sing paling penting kanggo nemtokake kemungkinan individu nyoba positif kanggo COVID-19 (Gambar 4f).Sakabèhé, peserta kanthi respon sel T kapiler spesifik SARS-CoV-2 ≤23.7 pg / mL IFN-γ duwe risiko infeksi 14.9% sajrone telung wulan dibandhingake karo respon> 141.6 pg / mL.ml IFN.-γ duwe risiko infeksi 4,4% (Tabel 2).
Tanggepan sel T IFN-γ+ spesifik kanggo SARS-CoV-2 (a; *P = 0.034) lan domain pengikat reseptor sing ditargetake IgG spesifik IgG ("RBD") (b), subunit spike 1 (' S1') (c), subunit spike 2 ('S2') (d) lan reaksi ikatan nukleokapsid ('N') (e).Peserta sing diidentifikasi positif kanggo tes COVID-19 (PCR lan/utawa tes aliran getih lateral), kabeh infeksi kedadeyan sajrone 3 wulan sampling getih.Perbandhingan digawe nggunakake test Mann-Whitney loro-buntut.Data ditampilake minangka grafik (garis tengah ing median, wates ndhuwur ing persentil 75, watesan ngisor ing persentil 25) kanthi kumis ing nilai minimal lan maksimal.Saben titik nggambarake donor.ns ora penting.Peta panas f nuduhake korélasi pangkat Spearman antarane variabel kanggo set data sing ditemtokake.Perbandhingan sing ora signifikan sacara statistik ora kalebu saka matriks lan ditandhani karo sel kosong.Data mentah diwenehake kanthi bentuk file data mentah.
Nalika kita pindhah menyang fase sabanjure pandemi COVID-19, fokus bakal pindhah saka pencegahan menyang manajemen risiko individu lan ngenali anggota masyarakat sing rawan.Nggawe hubungan kakebalan kanggo COVID-19 penting kanggo ngenali lan ngobati kelompok berisiko tinggi kanthi efektif.Saiki ana akeh bukti yen kekebalan sel T nglindhungi infeksi SARS-CoV-2 lan mbatesi keruwetan COVID-1910.Data sing ditampilake ing kene nuduhake manawa kekuatan gabungan saka respon sel IFN-γ+ T spesifik SARS-CoV-2 marang spike, membran, lan protein struktural nukleokapsid menehi proteksi sing luwih gedhe marang COVID-19 tinimbang ikatan antibodi.19 ningkatake utawa netralake respon. .lan kudu dianggep nalika netepake kakebalan individu lan / utawa komplotan.Virus RNA kayata SARS-CoV-2 utawa virus influenza A (IAV) ngindhari netralisasi serologis kanthi cepet berkembang epitop sel B sing kapapar ing antigen permukaan sing diakoni dening antibodi.Tanggepan imun protèktif sing disedhiyakake dening sel T bisa uga nggambarake nargetake epitope saka wilayah protein virus sing luwih lestari sing ora bisa cepet uwal saka respon imun.Perlindhungan sing dimediasi sel T marang varian SARS-CoV-2 novel padha karo proteksi heterosubtipik sing ditengahi dening target sel T saka protein intrinsik sing dikonservasi sing katon ing subtipe IAV22,23.
Sanajan ana potensial gedhe kanggo ngukur respon imun seluler marang COVID-19, kurang perhatian sing diwenehake kanggo pangembangan tes sel T sing akurat, dhuwur, lan standar.Kerumitan tradisional lan biaya sing ana gandhengane karo pangukuran respon sel T nyegah penentuan kekebalan sel T sing akurat nalika screening kanggo kekebalan populasi gedhe.Nalika sawetara tes stimulasi peptida getih komersial bubar kasedhiya, kabeh wong saiki mbutuhake phlebotomist kanggo entuk getih, mbatesi kasedhiyan lan skala.Sistem getih kapiler digunakake akeh kanggo nemtokake prevalensi antibodi SARS-CoV-2 ing sawijining populasi.Kita adaptasi tes getih kapiler kanggo nindakake tes stimulasi peptida getih kabeh kanggo netepake reaktivitas sel T menyang protein struktural SARS-CoV-2 lan respon antibodi spesifik SARS-CoV-2.Nyatane, pangukuran gabungan antibodi spesifik SARS-CoV-2 lan sel T ing sampel getih kapiler sing padha menarik banget: (i) nyuda kabutuhan tes getih kaping pirang-pirang saben peserta, (ii) nambah pengalaman lan pangerten peserta;(iii) nambah logistik lan nyuda duplikasi, (iv) nyuda dampak lingkungan amarga kurang bahan konsumsi laboratorium lan pangiriman sampel dibutuhake.Sanajan reaktivitas IFN-γ sakabèhé padha karo sampel getih vena lan kapiler sing cocog, diamati luwih murah ing kelompok getih kapiler peserta (Gambar 4a) dibandhingake karo kohort getih vena (Gambar 2a).Nilai IFN-γ Ana sawetara panjelasan kanggo temuan iki, yaiku, akeh peserta sing duwe komorbiditas sing mbutuhake terapi imunosupresif direkrut menyang kohort sampling getih kapiler (Tabel 1) lan Viabilitas lan / utawa fungsi sel T sing dipikolehi saka pembuluh darah. sampel bisa uga kurang, utamané njupuk menyang akun kahanan panyimpenan long-term conto sadurunge stimulasi peptida.
Vaksin COVID-19 sing saiki kasedhiya nyedhiyakake proteksi paling apik marang penyakit sing abot kanggo umume panampa sajrone 6 wulan vaksinasi8.Nyemangati, sanajan netralisasi serologis sing disebabake dening vaksin sing kurang saka varian SARS-CoV-26,7, respon sel T sing ditimbulake dening vaksinasi marang SARS-CoV-2 jinis liar tetep reaktif banget, amarga 25 liyane muncul.Data sing disedhiyakake ing kene nuduhake pentinge evaluasi imunogenisitas vaksin sing luwih akeh, nyorot vaksin kanthi kekebalan sel T sing ora cukup kanggo nyegah infeksi dadakan lan transmisi virus sing terus-terusan.Kita uga mirsani manawa akeh wong sing ora divaksinasi sing direkrut menyang kohort kapiler duwe respon signifikan saka sel T spesifik SARS-CoV-2 (lan IgG pengikat N) preduli saka vaksinasi sadurunge, sing bisa uga amarga infeksi sadurunge.Tinimbang menehi vaksin marang individu sing cocog, risiko infeksi kasebut kudu ditaksir adhedhasar status imunisasi sing saiki lan pilihan sing ditindakake.
Watesan panaliten iki kalebu jaminan manawa peserta nglaporake dhewe infeksi SARS-CoV-2 sawise koleksi getih kanggo nemtokake relevansi kekebalan;sawetara peserta bisa uga duwe infeksi asimtomatik lan ora bisa ngalami uji PCR lan/utawa aliran lateral kanggo COVID-19.Dataset kita uga ora duwe informasi babagan obat-obatan peserta nalika sampling getih.Kajaba iku, amarga kabeh peserta kita mung nglaporake gejala entheng / moderat utawa ora ana gejala, mula ora bisa ngerteni tanggapan kekebalan saka set data sing prédhiksi risiko tambah penyakit abot lan rawat inap kanggo COVID-19.Nanging, anané respon sel T CD8+ marang epitope spesifik nukleokapsid bubar digandhengake karo pangayoman marang COVID-1926 sing abot.Kajaba iku, tes sing digunakake ing kene ora ngukur tanggepan sel T kanggo protein non-struktural SARS-CoV-2 sing diungkapake awal sing bubar ditampilake luwih seneng nglumpukake ing buruh kesehatan seronegatif sing wis kontak karo pasien sing kena infeksi.Adhedhasar karya iki, amarga prevalensi transmisi komunitas nalika rekrutmen lan kemungkinan infeksi kontak sing dhuwur ing populasi, jumlah sel T spesifik SARS-CoV-2 sing ditemokake ing tes kita uga katon bisa ngresiki.infèksi subklinis ing kohort kita.Pungkasan, kita ora ngukur produksi interleukin 2 kanthi sel T amarga karya sadurunge nuduhake identifikasi sing kurang saka respon sel T spesifik SARS-CoV-214, sanajan tanggapan khusus IL-2 bisa uga nuduhake reaktivitas silang sing wis ana.sel sing ana gandhengane karo pertahanan marang infeksi SARS-CoV-211.
Digabungake, data kasebut nyoroti kabutuhan dhasar kanggo pasinaon longitudinal jangka panjang sing nggabungake respon sel T spesifik SARS-CoV-2 menyang ukuran kekebalan skala populasi.Upaya kasebut bisa dibantu dening pangembangan tes getih kapiler anyar sing ngukur respon sel T.
Proyek riset kasebut njupuk peserta wiwit Februari 2021 nganti Maret 2022. Kelompok donor sehat (n = 148) sing nyumbang conto getih vena utamane kalebu staf universitas lan siswa sing melu layanan screening COVID-19 Universitas Cardiff utawa staf ing sekolah dasar ing Cardiff.Kabeh peserta padha sehat lan ora nglaporake njupuk obat imunosupresif (pirsani Tabel 1 kanggo karakteristik).Kohort peserta sing nyumbang conto getih kapiler kalebu kabeh donor sukarela (umur 18+) saka saindenging Inggris.Antarane 24 Januari lan 14 Maret 2022, 342 peserta didaftarkan ing panliten kasebut, sing 299 ngirim sampel getih menyang laboratorium.Akeh peserta tetep ora divaksinasi lan / utawa dilapurake komorbiditas serius, kalebu penyakit otoimun lan kanker (pirsani Tabel 1 kanggo karakteristik).Panaliten iki nampa persetujuan etika saka Komite Etika Riset Newcastle lan North Tyneside 2 (ID IRAS: 294246) lan Komite Etika Riset Sekolah Kedokteran Universitas Cardiff (SREC ref: SMREC 21/01).Kabeh peserta menehi persetujuan tertulis sadurunge dilebokake.Peserta ora entuk ganti rugi kanggo melu ing panliten iki.
Sampel getih vena dijupuk kanthi venipuncture dadi 6 utawa 10 ml lithium utawa sodium heparin vacutainer (BD).Sampel getih kapiler dijupuk nganggo lancet driji banjur diklumpukake ing mikrokontainer heparin (BD).Paling ora 400 µl getih dibutuhake;sembarang sampel kurang saka jumlah iki bakal ditolak.Alasan liyane kanggo penolakan sampel kalebu koagulasi massive lan / utawa hemolisis lan gagal ngumpulake plasma viscous kanggo analisis (Tambahan Gambar 5).Gunggunge 299 conto getih kapiler kasedhiya kanggo ngevaluasi respon antibodi, lan 270 conto uga kasedhiya kanggo ngevaluasi respon sel T.
Tanggapan sel T spesifik SARS-CoV-2 ditaksir nggunakake tes COVID-19 Immuno-T (ImmunoServ Ltd) lan ditindakake kaya sing wis diterangake sadurunge14.Sedhela, siji 6 ml utawa 10 ml sodium heparin (BD) vacutainer vena dijupuk saka saben peserta lan diproses ing laboratorium ing 12 jam koleksi getih.Sanajan umume spesimen diproses sajrone 24 jam, siji 400-600 μl heparinized microbleeding (BD) getih kapiler diklumpukake sajrone 48 jam sampling fingerstick.Sampel getih vena lan/utawa kapiler dirangsang kanthi kolam peptida sing kapisah khusus kanggo SARS-CoV-2 (varian jinis liar) kaya sing wis diterangake sadurunge14.Pustaka peptida iki ngemot 420 urutan 15-mer kanthi 11 asam amino tumpang tindih sing nyakup kabeh protein spike (S1 lan S2) (S; protein NCBI: QHD43416 1), nukleokapsid fosfoprotein (NP; protein NCBI: QHD43423 2) lan glikoprotein membran (M). Protein NCBI: QHD43419 1) urutan coding (disebut "perpustakaan peptida kombinatorial S- / NP- / M").Kabeh peptida diresiki nganti> 70%, dibubarake ing banyu steril lan digunakake ing konsentrasi pungkasan 0,5 μg / ml saben peptida.Sampel diinkubasi ing suhu 37 ° C suwene 20-24 jam.Tabung kasebut banjur disentrifugasi ing 5000 × g suwene 3 menit lan ~ 150 μl plasma diklumpukake saka ndhuwur saben sampel getih.Simpen conto plasma ing -20°C nganti sewulan sadurunge nglakokake tes deteksi sitokin/antibodi.
IFN-γ diukur nggunakake Set Deluxe IFN-γ ELISA MAX (BioLegend, nomer katalog 430116) lan ditindakake miturut pandhuane pabrikan.Sanalika sawise solusi stop (2N H2SO4) ditambahake, microplate diwaca ing 450 nm nggunakake BioLegend Mini ELISA plate reader.IFN-γ diukur kanthi ekstrapolasi kurva standar nggunakake GraphPad Prism.Nilai ing ngisor watesan deteksi ngisor saka assay kacathet minangka 7.8 pg / ml, nilai ing ndhuwur watesan deteksi ndhuwur saka assay dicathet minangka 1000 pg / ml.
Antibodi IgG Anti-SARS-CoV-2 RBD/S1/S2/N diukur nggunakake panel Bio-Plex Pro Human IgG SARS-CoV-2 4-plex (Bio-Rad, cat. no. 12014634) lan diwenehi label miturut instruksi pabrikan.instruksi .Nilai nglaporake conto ing ndhuwur watesan kuantitatif dianalisis maneh ing pengenceran 1:1000.Intensitas fluoresensi rata-rata manik diukur ing instrumen Bio-Plex 200 (Bio-Rad).Konsentrasi antibodi diwilang dening uji kontrol tunggal VIROTROL SARS-CoV-2 (Bio-Rad) lan diowahi dadi WHO/NIBSC 20/136 International Reference Standard Units (BAU/mL) nggunakake faktor kalibrasi pabrikan.
Antibodi netralisasi spesifik subunit RBD lan S1 nglawan jinis liar lan delta SARS-CoV-2 (B.1.617) garis SARS-CoV-2 diukur nggunakake Kit Antibodi Neutralisasi Varian Bio-Plex Pro Human SARS-CoV-2 (Bio -Rad, bagean no. 12016897), miturut pandhuan pabrikan.Ukur intensitas fluoresensi rata-rata ing Bio-Plex 200 (Bio-Rad) lan etung persen inhibisi (yaiku, netralisasi) nggunakake rumus ing ngisor iki:
Tes netralisasi infeksius kanggo SARS-CoV-2 ditindakake kaya sing wis diterangake sadurunge28.Sedhela, 600 PFU saka jinis liar SARS-CoV-2 diinkubasi nganggo pengenceran plasma 3 kali lipat kanthi duplikat sajrone 1 jam ing suhu 37 ° C.Campuran kasebut banjur ditambahake menyang sel VeroE6 suwene 48 jam.Monolayers tetep karo 4% paraformaldehyde, permeabilised karo 0,5% NP-40 lan inkubasi kanggo 1 jam ing blocking buffer (PBS ngemot 0,1% tween lan 3% susu skim).Antibodi primer (anti-nukleokapsid 1C7, Stratech) ditambahake kanggo pamblokiran buffer sajrone 1 jam ing suhu kamar.Sawise ngumbah, antibodi sekunder (anti-mouse IgG-HRP, Pierce) ditambahake kanggo pamblokiran buffer sajrone 1 jam.Monolayers padha sakabeheng, dikembangaké nggunakake Sigmafast OPD lan maca ing maca plate Clariostar Omega.Sumur tanpa virus, tanpa virus nanging tanpa antibodi, lan sera normal sing nuduhake aktivitas penengah kalebu ing saben eksperimen minangka kontrol.
Analisis statistik ditindakake ing GraphPad Prism (versi 9.4.1).Normalitas kumpulan data diuji nggunakake uji Shapiro-Wilk.Kriteria non-parametrik digunakake kanggo kabeh perbandingan.Tes Mann-Whitney digunakake kanggo sampel sing ora dipasangake.Kabeh tes ana loro-lorone kanthi ambang signifikansi nominal P ≤ 0,05.
Analisis eksplorasi awal saka dataset ditindakake ing R (versi 4.0.3).Iki kalebu pangembangan matriks korelasi peringkat univariat Spearman, ing ngendi korélasi antarane rong variabel diwakili kanthi ukuran lan werna kothak.Signifikansi statistik antarane asosiasi diitung nggunakake rho Spearman, ing ngendi nilai ≤0,05 dianggep signifikan.Perbandhingan sing ora signifikan sacara statistik ora kalebu saka matriks lan ditandhani karo sel kosong.P-nilai wis diatur kanggo macem-macem bandingaken nggunakake koreksi Holm.Model regresi logistik binar digunakake kanggo simulasi efek variabel ing dataset ing respon positif marang COVID-19.Tanggapan sel T IFN-γ lan skor titer IgG anti-RBD / S1 / S2 / N diowahi dadi faktor, ing ngendi saben individu ditugasake menyang kuartil sing cocog kanggo saben skor.Sawisé iku, model riset awal dikembangaké nggunakake fungsi glm ing paket statistik (V4.0.3).Ing rasio rintangan asalé saka model asli iki dijupuk saka koefisien saka model nggunakake fungsi 'odds_plot' ing paket OddsPlotty (V1.0.2).Nalika ngembangake model validasi silang, kita nggunakake fungsi "bestglm" saka paket bestglm (V0.37.3) kanggo mbatesi bias pangguna lan mesthekake yen subset prediktor sing paling apik bisa dipilih.Cara sing dipilih yaiku "lengkap" lan kriteria informasi sing digunakake kanggo netepake kecocokan model yaiku AIC.Alur kerja sing padha ing ndhuwur digunakake kanggo entuk rasio rintangan.
Kanggo informasi luwih lengkap babagan desain sinau, waca abstrak sinau Alam sing ana gandhengane karo artikel iki.
Surat lan panjalukan kanggo bahan kudu diarahake menyang Dr. Martin Scarr utawa Profesor Andrew Godkin.Artikel iki nyedhiyakake data asli.
Kode R sing digunakake kanggo nggawe model statistik kasedhiya kanggo umum tanpa panjaluk29.Informasi lan lisensi cetak ulang bisa ditemokake ing www.nature.com/reprints.
Munro, APS et al.Keamanan lan imunogenisitas pitung vaksin COVID-19 minangka dosis katelu (booster) sawise rong dosis ChAdOx1 nCov-19 utawa BNT162b2 (COV-BOOST) ing Inggris: fase 2, buta, multisenter, acak, nyoba kontrol.Lancet 398, 2258–2276 (2021).
Stewart, ASV et al.Imunogenisitas, safety, lan reactogenicity saka vaksinasi primer heterologous marang COVID-19 (Com-COV2) nggunakake mRNA, vektor virus, lan vaksin adjuvant protein ing Inggris: fase 2, siji-buta, uji coba acak, tes non-inferioritas.Lancet 399, 36–49 (2022).
Lee, ARIB et al.Khasiat Vaksin COVID-19 ing Pasien Immunocompromised: Tinjauan Sistematis lan Meta-Analisis.BMJ 376, e068632 (2022).
Dejnirattisai, W. et al.Ngurangi netralisasi varian mikron SARS-CoV-2 B.1.1.529 dening serum sawise imunisasi.Lancet 399, 234–236 (2022).
Lipsich M, Krammer F, Regev-Yohai G, Lustig Y, lan Baliser RD Terobosan infeksi ing individu sing divaksinasi SARS-CoV-2: pangukuran, panyebab, lan akibat.Imam Nasional Imunologi.https://doi.org/10.1038/s41577-021-00662-4 (2021).
Levin, EG et al.Tanggepan humoral imun sing kurang kanggo vaksin BNT162b2 Covid-19 suwene 6 wulan.N. ing.J. Kedokteran.385, e84 (2021).
Carreño, JM et al.Aktivitas sera konvalesen lan vaksin nglawan Omicron SARS-CoV-2.Alam 602, 682–688 (2022).
Chemaitelly, H. et al.Duration saka pangayoman saka vaksin mRNA Qatari marang SARS-CoV-2 Omicron BA.1 lan BA.2 subvariants.medrxiv https://doi.org/10.1101/2022.03.13.22272308 (2022).
Tai, MZ et al.Frekuensi sel B memori mudhun kanthi infeksi terobosan vaksin delta COVID-19.Kedokteran Molekuler EMBO.14, e15227 (2022).
Kundu, R. et al.Sel T memori reaktif silang digandhengake karo nglindhungi kontak COVID-19 saka infeksi SARS-CoV-2.Komune nasional.13, 80 (2022).
Geurtsvan Kessel, CH et al.Tanggepan sel T omicron-reaktif SARS CoV-2 lan sel B sing khas ing panampa vaksin COVID-19.ngelmu.Imunologi.https://doi.org/10.1126/sciimmunol.abo2202 (2022).
Gao, Yu et al.Sel T spesifik SARS-CoV-2 sing diwarisake ngenali silang varian Omicron.Obat nasional.28, 472–476 (2022).
Scarr, MJ et al.Pangukuran sel T spesifik SARS-CoV-2 saka getih wutuh nuduhake infeksi asimtomatik lan imunogenisitas vaksin ing individu sing sehat lan pasien kanker organ padhet Imunologi https://doi.org/10.1111/imm.13433 (2021).
Tan, AT et al.Pangukuran cepet sel T spike SARS-CoV-2 ing getih kabeh wong sing divaksinasi lan sing kena infeksi alami.J. Klinis.nandur modal.https://doi.org/10.1172/JCI152379 (2021).
Tallantyre, EU et al.Tanggapan Vaksin COVID-19 ing Pasien Multiple Sclerosis.nginstal.Neuron.91, 89–100 (2022).
Bradley RE et al.Infeksi COVID-19 sing terus-terusan karo sindrom Wiskott-Aldrich ilang sawise vaksinasi terapeutik: laporan kasus.J. Klinis.Imunologi.42, 32–35 (2022).